在美國FDA於2022年三月發布CAR-T細胞產品的產業指引草案（Consideration for the Development of Chimeric Antigen Receptor [CAR] T Cell Products: Draft Guidance for Industry 1）中，針對CAR T細胞，FDA對於早期IND之CMC審查考量重點如下：
(a) 製程與控制：關於CAR T細胞製造中所需要的特定輔料（ancillary materials），建議透過輔料供應商針對品質、安全性、與效價等進行適當的管控計畫，比如提供檢疫、適當的檢測、分析證書（Certificate of Analysis）、或原產地證書（Certificate of Origin）等。關於CAR T細胞製造過程中所使用的製造器材，不需一定要為FDA核准或取得輸入許可的醫療器材，但仍需符合關鍵品質因素（critical quality attributes，CQA）的評估。
在IND的審查案件中，若製成提到的物料與製造設備、流程與製造廠資料與曾送入FDA的案件相同，則可使用交叉引用的方式提供資料。
(b) 分析方法：通常Phase 1階段的IND不需要分析方法之確效，但仍建議提供適當的分析方法資料（需為specific、sensitive、reproducible、和適當控制的方法）。FDA針對以下幾個常用細胞分析測試分別提出建議：
- 流式細胞技術（Flow cytometry）：建議在早期IND時即提供所用之流式細胞技術的方法資訊，應包含活細胞/死細胞與細胞相關不純物之含量測定，另外也應提供儀器校正與品質管制的資訊。建議直接測定CAR陽性細胞的比例，若要使用替代蛋白表現來測定CAR的轉植，則需要先建立替代蛋白與CAR表現的關聯性並提供sensitivity與specificity的資料。
- 載體拷貝數目（Vector Copy Number [VCN]）：如果基因嵌入是利用載體系統達成，載體拷貝數目必須逐批測定並報告於分析證書中。載體拷貝數目的放行標準必須考量插入型突變（insertional mutagenesis）之風險。
- 鑑別（Identity）：建議CAR T的鑑別測試應包含嵌入基因的分析（如：以流式細胞技術測定CAR表現、以PCR測定嵌入基因）與最終產品的特定細胞組成分析（如：細胞表面標記）。
- 效價（Potency）：載體與最終細胞產品皆須進行效價分析。因為CAR T細胞製劑經常透過多種機制達到殺死標的細胞的作用，所以建議使用多重分析結果來評估產品效價。如果CAR T細胞包含多種嵌入基因，則須分別針對各別活性功能進行效價分析。
(c) 安定性：若規劃以新鮮製備的CAR T細胞進行給藥，建議針對產品進行由最終產品到給藥間預估的期間進行安定性試驗。
(d) CAR T細胞標示：IND階段的細胞標示須符合相關法規之規定，並建議再CTD-Module 1中提供範本標籤。自體CAR T細胞產品之標示上須包含至少兩種識別方式。
除了以上在本指引草案中提到之建議，也可參考2020年的CMC產業指引 2中對人類基因治療產品之一般性建議。
延伸閱讀：
1. U.S. FDA. Consideration for the Development of Chimeric Antigen Receptor [CAR] T Cell Products: Draft Guidance for Industry. March 2022.
2. U.S. FDA. Chemistry, Manufacturing, and Control (CMC) Information for Human Gene Therapy Investigational New Drug Applications (INDs): Guidance for Industry, January 2020.